真空離心濃縮就是采用離心機、真空和加熱相結合的方法,在真空狀態(tài)下離心樣品,并通過超低溫的冷阱捕捉溶劑,從而將溶劑快速蒸發(fā)達到濃縮或干燥樣品的目的。離心濃縮后的樣品可方便地用于各種定性和定量分析。
相對于其他濃縮方法,真空離心濃縮法的優(yōu)點是樣品的回收率較高,對環(huán)境的危害比較小,并且一般的真空離心濃縮儀操作較為簡單,無需復雜的實驗設計等。
主要應用領域有:
① DNA/RNA的濃縮
② 藥物代謝物的濃縮
③ 液相色譜的前后處理
④ 免疫球蛋白的濃縮等
選擇真空離心濃縮儀時應該注意哪些事項呢?
1、選擇合適的真空泵
設備原理即是通過制造真空環(huán)境來降低溶劑沸點、使得溶劑變得容易蒸發(fā),所以,真空泵的選擇是必需的。真空泵并不是越高級越好,選擇要針對實際的實驗情況,尤其是溶劑種類來選擇。不同的溶劑其沸點與凝固點不同,常壓下中低沸點溶劑(如乙醇)和高沸點溶劑如DMSO對泵的要求不同。
2、真空控制功能
由于并不是所有的真空泵能針對真空離心濃縮系統(tǒng)的真空環(huán)境的變化調(diào)整泵自身的工作情況,如是否需要調(diào)整抽氣速率、是否需要泵的關與開等,如果任由泵無限抽真空,會導致樣品結冰,反而降低濃縮效率;如果一味提高濃縮效率將真空值設得不夠高的話,又會對樣品活性造成影響,所以為了達到理想的濃縮效果和樣品的活性,真空控制功能是第二個要考慮的因素。
3、選擇合適的主機和轉(zhuǎn)子
根據(jù)樣品量大小、盛裝樣品的容器類型、對濃縮效率的期許和日后濃縮系統(tǒng)的拓寬和升級等諸多情況,綜合考慮蒸發(fā)面積的影響、溫度對蒸發(fā)效率的影響、合適的離心機轉(zhuǎn)子、是否需要聯(lián)用凍干機、是否需要測定樣品溫度等情況幫你選擇佳的主機。
4、是否需要冷阱?
冷阱有-55℃,-85℃和-110℃等多種溫度,主要選擇的依據(jù)是凝結什么類型的樣品。通常,水溶液選擇-55℃冷阱,有機溶劑選擇-85℃冷阱。同時,還需要根據(jù)您的樣品量大小、溶劑是否需要回收利用以及您的經(jīng)費預算等情況綜合考慮。